В разных клиниках ЭКО детали лечения могут различаться, но общие принципы едины во всех центрах. Лечение подразделяется на ряд этапов и одинаково для всех пар. Исключением является только внутрицитоплазматическое введение сперматозоидов (ICSI) при мужском бесплодии, вызванном недостаточностью или отсутствием сперматозоидов. При ЭКО могут быть различны этапы in vitro, но это не влияет на ведение пациентов.
Овариальная стимуляция
Цель овариальной стимуляции - собрать достаточное количество яйцеклеток из яичников, чтобы иметь максимальный шанс получения нескольких эмбрионов, из которых три могут быть отобраны для пересадки в матку, а несколько эмбрионов могут быть взяты для криоконсервации.
В настоящее время используется лекарственная схема для включения начальной фазы понижающей регуляции, или питуитарной супрессии, с использованием аналога (лекарство, имеющее те же характеристики, что и природное соединение) рилизинг-фактора-лютеинизирующего гормона (LHRH). За этим следует стимуляция фолликулостимулирующим гормоном (ФСГ). Тщательно устанавливается соответствующая доза, с учетом различных факторов, таких как возраст женщины и базальный уровень ФСГ в сыворотке (естественный уровень образования ФСГ у женщины). Женщины старшего возраста и женщины с повышенным уровнем ФСГ получают более высокие дозы ФСГ, поскольку они, по всей вероятности, имеют сниженный овариальный резерв. Слишком высокая доза может привести к гиперответу, который может вызвать серьезное осложнение, известное как синдром гиперстимуляции яичников (OHSS, см. ниже).
Контроль
Развитие яйцеклеток контролируется ультразвуком с использованием вагинального зонда. Женщину обычно вызывают через восемь-десять дней после стимуляции ФСГ. Определяют число и размер овариальных фолликулов, в которых развиваются яйцеклетки.
Если на этой стадии ответ и, соответственно, риск OHSS будет признан слишком высоким, цикл может быть прерван, и ввод ФСГ прекращен. Для большинства женщин, продолжающих лечение, будут проводиться дальнейшие сканирования, число и частота которых могут различаться. Когда фолликулы достигнут оптимального размера (около 17 мм в диаметре), назначается время забора яйцеклеток.
В некоторых центрах проводится дополнительный контроль путем измерения уровня эстрадиола в сыворотке, так как он может служить показателем риска развития OHSS (хотя это не доказано) и качества развивающихся яйцеклеток.
Как только устанавливается время забора яйцеклеток, введение ФСГ прекращается. За 34-36 часов до запланированной процедуры делается инъекция человеческого хорионального гонадотропина (чХГ, hCG). Этот гормон инициирует овуляцию, имитируя эффект выброса лютеинизирующего гормона (ЛГ), возникающего при нормальном менструальном цикле.
Четыре стадии ЭКО
Ультразвуковой мониторинг. Примерно через 10 дней после лекарственной стимуляции яичников, проводится ультразвуковой мониторинг фолликулов, чтобы убедиться в нормальной реакции женского организма. На экране видны фолликулы, каждый из которых содержит одну яйцеклетку.
Аспирация эмбрионов. После проведения ЭКО сотрудник под микроскопом аспирирует (забирает) несколько эмбрионов в шприц. Эмбрионы в количестве от одного до трех будут позже пересажены гинекологом в матку женщины.
Пересадка эмбриона. Сразу после оплодотворения яйцеклеток, в матку может быть пересажено до трех полученных эмбрионов, чтобы увеличить вероятность имплантации. Гинеколог использует зеркало, для того чтобы открыть влагалище.
Техника пересадки. Эмбрионы при помощи шприца и катетера вводятся в полость матки. Затем они самостоятельно внедряются в стенку матки, точно так же, как они это делают при нормальной беременности.
Забор яйцеклеток
При помощи пункционной иглы, введенной через влагалище, под контролем ультразвука из каждого созревшего фолликула яичника аспирируется (отсасывается) жидкость, содержащая яйцеклетки. Забор может проводиться под местной анестезией при воздействии седативных средств, но в ряде центров эту процедуру делают под общей анестезией. Яйцеклетки слишком малы, чтобы их видеть невооруженным глазом (диаметр ОД мм), но их окружает масса клейких хлопьев, которую относительно хорошо видно. Аспирированные яйцеклетки помещают в лабораторные чашки, содержащие культуральную среду для инкубации перед оплодотворением.
Используя трансвагинальный зонд, хирург отсасывает яйцеклетки из яичника женщины. Под контролем ультразвукового монитора (справа), доктор проводит пункционную иглу через влагалище к яичникам.
Оплодотворение
Оплодотворение осуществляется путем добавления небольшого объема суспензии сперматозоидов в культуральные чашки, содержащие яйцеклетки. Образцы сперматозоидов готовят, используя специальную методику, при которой отмывается семенная плазма, удаляются органические остатки и концентрируются наиболее активные сперматозоиды. Успех оплодотворения можно определить через 18 часов, когда через цитоплазму становятся видны два пронуклеуса. На этой стадии все эмбрионы выглядят почти одинаково. Если все сперматозоиды нормальны, оплодотворяется около 60 процентов яйцеклеток. Возможно, что остальные яйцеклетки недостаточно развиты для осуществления нормального оплодотворения, несмотря на то что подвергаются одному и тому же гормональному воздействию.
Зрелая яйцеклетка (розовая) видна на окрашенном световом микроснимке. Вокруг яйцеклетки - защитный слой, прозрачная зона. Снаружи - слои клеток, образующих лучистый венец (желтый), питающий яйцеклетку.
На световом микроснимке показаны плавающие сперматозоиды. Они состоят из головки и хвоста. Хвост дает возможность сперматозоиду достигнуть яйцеклетки. Головка содержит генетический материал.
Развивающийся эмбрион
При нормальной беременности оплодотворение происходит в фаллопиевых трубах женщины через 48 часов после полового акта. Оплодотворенное яйцо, или зигота, проделывает путь в матку для имплантации. От оплодотворения до двухклеточной стадии проходит около 30 часов.
При ЭКО эмбрион проходит такой же процесс развития благодаря инкубации в культуральной среде, сходной со средой в фаллопиевой трубе. Первое деление образует две клетки, бластомеры, каждая из которых будет продолжать делиться, формируя эмбрион.
Пересадка эмбриона в матку
Обычно пересадку эмбриона проводят через два дня после забора яйцеклеток, когда эмбрион достигает двух-четырех-клеточной стадии, хотя после оплодотворения in vivo (при естественном зачатии) он не достигает матки раньше чем на пятый день.
Пересадка может проводиться в любой день между первым (стадия пронуклеусов) и пятым (стадия бластоцист), но наиболее часто проводится по прошествии двух дней. Культуральная среда не идеальна для развития эмбриона, и предпочтительно проводить пересадку в естественные условия по возможности быстро. Второй день - самое раннее время, при котором по внешнему виду эмбрионов можно определить их жизнеспособность. Только 15-20 процентов эмбрионов человека, получаемых in vitro, потенциально могут продолжить развитие.
Установление жизнеспособности проводится при тщательном исследовании формы и размера клеток, степени клеточной фрагментации, так как клетки эмбриона продолжают делиться и размножаться. Реально процедура пересадки очень проста и не требует применения седативных средств или анестезии. В тонкий катетер засасывается три эмбриона в небольшом объеме культуральной среды, катетер вводится через цервикальный канал (шейку матки), и эмбрионы высвобождаются в полость матки в области дна. Методика позволяет им имплантироваться в стенку матки, как при нормальной беременности.
Часто проводится гормональная поддержка имплантации. При учете разнообразных факторов шанс достигнуть беременности в каждом цикле лечения у большинства пар - один из шести.
Тело человека. Снаружи и внутри. №5 2008